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解讀HPLC色譜柱和UHPLC色譜柱相似但不相同的點

發布時間:2018-07-24瀏覽:2544次
1. HPLC色譜柱和UHPLC色譜柱這兩款柱子是類似的。當然,不同系列的柱子可能配備其他的類型的色譜柱會有差異。Plus的只配備了同填料的制備柱;而XDB則同時配備了毛細管柱及制備柱;有同類型的制備柱這就方便我們從分析柱上無縫轉移我們的方法到制備柱上。
2. 關于色譜柱的其他型號規格,諸如內徑,粒徑,配備的柱長就不多敘述,這點中就能比較清晰的看見兩個不同型號的色譜柱配備了哪些規格的色譜柱。(這里的規格是指大家工作過程當中zui常說的柱長/粒徑/內徑)
3. 我們主要看下其填料類型:HPLC色譜柱和UHPLC色譜柱兩款色譜柱都是TMS雙封端(除plus系列中的苯基柱未封端)。溫度上限均為60℃,pH使用范圍為2.0——9.0.載碳量是我們平常除了第2條中的型號外比較關心的一個參數。通常我們說,載碳量大,保留更強。從這里我們可以看出來,以C18為例,XDB(10%)比plus(9%)應當保留更強。
4. 說到這里,說的都是HPLC色譜柱和UHPLC色譜柱兩款柱子一樣的參數。那他們不一樣的地方在哪里呢?——孔徑和比表面積。這兩者的參數也直接影響到載碳量??讖皆叫〉奶盍?,比表面積也會越大。從而可能導致載碳量更大。這點從上述兩個系列的對比可以看出來。Plus孔徑大,其比表面積就較XDB小,而恰好,XDB的載碳量就高于plus那么一點點。當然,載碳量還跟鍵合相的密度有關系。
5. 這兩者色譜柱間相似的關鍵參數較多,所以,無論是在疏水選擇性上,與組分的氫鍵相互作用上都比較相似,可以通用。當然,由于載碳量的差異,疏水選擇性上會有微小的差異;另外,由于兩者不同的孔徑所帶來的比表面積不一致,包括鍵合相密度差異則會帶來形狀選擇性的差異。
6. zui后,盡管上述色譜柱推薦的ph使用范圍為2——9,但是仍然建議若色譜條件為pH>7,特別是溫度較高的情況,如果條件允許,就不要選擇這兩個系列的產品了。請選擇耐更高pH的雜化柱。若需要在較強酸性條件下,也建議選擇專門為酸性條件設計的色譜柱,當然,酸性條件沒有堿性條件帶來的對柱壽命的影響大,除非是比較極限的條件(如<1)。當然,如果您不介意柱壽命,也并非不能在比較極限的情況下使用柱子。從另一個角度來說,資源的可持續發展也要求我們對現有的資源達到利用zui大化。
色譜技術的發展給我們提供了非常便利的條件。除了傳統的分析柱之外,快速分析柱、兼容于普通HPLC的核殼柱,當然還有UPLC/UHPLC柱給我們帶來了較高的通量。我們可以在保證分離足夠的情況下花費更短的時間。在實際工作過程當中,我們也可以有意識的把某些老的方法轉移到更快速的柱子上,以達到更高的效率。
色譜柱的好壞并不局限,合適的就是好的。
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